48t/96t 大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號:48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
別名:大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit
貨號:fk-m0054
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8°
有效期:6個月
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好。
用途:科研實驗所用,不作臨床使用。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒 本試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒 本試劑盒實驗原理:
大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒超氧化物歧化酶(SOD)是生物體內(nèi)一種重要的超氧陰離子自由基清除劑,分為CU,Zn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD3類,在生物界分布較廣,其主要作用是能專一地清除生物氧化中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基(O2-.),有助于減少和阻止脂質(zhì)的過氧化反應、延緩機體衰老。
大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測試劑盒基本原理有三條:
1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設標準孔、待測樣品孔50μl,注意不要有氣泡。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁。
2. 每孔加酶結合物50μl。輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應60分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒
4. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl,37℃避光顯色(15分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

大鼠粒細胞集落刺激因子ELISA試劑盒注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%
1。貼壁細胞應分離胰蛋白酶和離心后收集(懸浮細胞將離心收集直接)。
2。洗細胞三次冷PBS。
3。懸浮細胞在PBS(1×)和細胞受超聲處理4次(或≤冷凍細胞-20°C。用溫和的混融細胞。3次重復凍結/解凍周期。)
4。在1500×g離心10分鐘在2到8攝氏度去除細胞碎片。細胞培養(yǎng)上清和其他生物液體在1000×g離心20分鐘去除樣品顆粒和即刻檢測或者商店樣品在-20°C或稀釋后使用80oC。避免重復凍結/解凍循環(huán)。
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