48t/96t 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit
簡單介紹
48t/96t 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit的詳細介紹
中文名:小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit
貨號:fk-m00166
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
銷售:量大從優(yōu)、質量保證。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒:白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。

1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:zui低檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
ELISA試劑盒安全性:
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
5.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
6.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit 原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標本的處理:
(1)細胞培養(yǎng)上清液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
(2)腦脊液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標準稀釋液12倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質影響檢測,按照說明書方法檢測。
ELISA檢測試劑盒需自備的設備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit注意事項:
1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應時間的誤差,做大量標本時,一孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正?,F象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響大,建議校對加樣器。
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