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公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

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犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒
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犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒

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產品名稱:犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒

產品型號:

產品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡單介紹

犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒,范圍:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。

犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒的詳細介紹

犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒檢測說明書詳細介紹:


中文名:犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒

中文別名:犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA Kit

貨號:fk-m00805

供應商:上海古朵

規(guī)格:48t/96t

保存:2-8℃

有效期:6個月

范圍:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。

特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。

樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。

應用:ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。

犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒檢測說明書詳細介紹

犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒樣本保存:
1.細胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2.細胞:
用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3.血清:
在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4.血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5.體液:
包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.組織標本:
切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7.保存:
如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。



犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。



犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。



犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA試劑盒原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標本的處理:
(1)細胞培養(yǎng)上清液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
(2)腦脊液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標準稀釋液90倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質影響檢測,按照說明書操作。

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