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中文名：免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA 試劑盒
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。


免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 操作時注意事項：
1. Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔一孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5.嚴格按說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
6.本試劑不同批號組分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.底物請避光保存。



操作步驟：
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2. 取出酶標板，按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標記溶液；(不含空白對照孔)
6. 將酶標板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標板洗滌后用吸水紙徹底拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；


操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50?l，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50?l，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 常見問題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍；
2、加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理；
3、洗板時容易造成誤差： 因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動；
4、顯色問題： 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應(yīng)的時候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時候先應(yīng)該保證板的清潔干凈；
7、嚴格按照說明書操作。







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