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中文名：免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA 試劑盒
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個(gè)月
樣本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
運(yùn)輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。


免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 操作時(shí)注意事項(xiàng)：
1. Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔OD值的），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5.嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.底物請(qǐng)避光保存。



操作步驟：
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙徹底拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；


操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50?l。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測(cè)樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50?l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍；
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題：在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候，會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況，這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí)，然后在進(jìn)行離心處理；
3、洗板時(shí)容易造成誤差： 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的，這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)；
4、顯色問(wèn)題： 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng)，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時(shí)候先應(yīng)該保證板的清潔干凈；
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。







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